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纯化后的多肽中还有哪些杂质?

人气:100发表时间:2017-02-15 00:00:00【
       多肽的纯度是指HPLC方法在214nm处检测到的目标多肽的含量(214nm是肽链的吸收波长),紫外分光光度计检测不到水和残留的盐不。可发现其他的杂质包括:缺失序列(缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列),截断序列(加帽过程中产生的序列)脱保护不完全序列(产生于整个合成过程或最后的裂解过程)。

       多肽纯化不涉及水和盐。HPLC纯化会产生少量的TFA,如:游离的氨基末端和其他侧链如Arg、Lys、His都可生成少量TFA杂质。通常交付的多肽多含有微量TFA和残留水。即使处于冻干状态,水也会因共价结合的能力不同而不同程度地存在着。

      在多肽中还存在哪些其他物质(杂质)?

杂质

纯化前的多肽

纯化后的多肽(HPLC)

缺失序列1

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截断序列2

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脱保护不完全序列3

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裂解过程中被修改的序列4

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DTT (dithiothreitol,二巯基苏糖醇)

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TFA (trifluoroacetic acid,三氟乙酸)

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Acetic acid(醋酸)

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某个氨基酸发生了副反应的多肽,如脯氨酸异构化等。

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      纯化前的多肽中包含的杂质包括多肽和非多肽物质, 纯化后的多肽中包含的杂质除了TFA盐,大多数为序列被修改的多肽。

    缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列
    为避免缺失序列的产生而进行的加帽操作,截断序列即产生于加帽过程中
    产生于整个合成过程或最后的裂解过程
    保护基重新附着在多肽的其他位置
责任编辑:Jason 
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