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疏水多肽如何用DMSO溶解?

人气:100发表时间:2017-02-15 00:00:00【
      二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物,分子式为(CH3)2SO,常温下为无色无臭的透明液体。DMSO作为冷冻保护剂经常应用于细胞库。在细胞冷冻过程中,DMSO可防止胞内/胞外晶体的形成,其工作浓度为10%。DMSO通常可与盐或血清白蛋白结合。

      疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加细胞的通透性,若多肽溶解于DMSO中则会对细胞产生毒性作用。高浓度的DMSO绝不可应用于细胞培养中。浓度为5%的DMSO即可让细胞膜溶解。大多数细胞株可以容忍0.5% DMSO,少许可以容忍1%的浓度,而不表现出严重的细胞毒性。然而原代细胞培养对其更敏感。所以如果是用原代细胞做剂量/反应曲线(可行性),其浓度应低于0.1%。

      对于某些疏水性非常高的多肽,可先尝试将其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中,然后慢慢 (一滴一滴地)将其添加到不断搅拌的水溶液如PBS或其他想要的缓冲液中,直至理想浓度。如果滴加过程中,肽溶液开始变浑浊,说明已经达到了溶解极限。另外,超声波有助于多肽溶解。

经验:
    对几乎所有的细胞来说,浓度为0.1%DMSO是安全的。
    广泛被用于细胞培养的DMSO终浓度为0.5%,不会引起细胞毒性。
    虽然对部份细胞来说,1%DMSO也不会产生细胞毒性,但我们推荐0.5%。
    也有5%DMSO成功地应用于某些细胞的案例。
    始终保持终浓度在0.5%,但储存时可200倍高浓度溶于100%的DMSO中。
责任编辑:Jason 
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